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·前言 以外泌體為代表的細胞外囊泡是各個細胞釋放出的膜囊泡,它作為細胞間信息傳遞的使者和疾病生物標志物,近年來受到了極高的關注*1)。雖然幾年有關外泌體的研究在各領域中不斷增長,但實驗技術尚在發展階段,還存在很多需要改善的問題。FUJIFILM Wako開發了一種新的親和分離法——“PS親和法”,與傳統方法相比,能從各種樣品中提取出完整且高純度的外泌體,而且,該技術還成功開發出用于外泌體檢測的...
近來關于細胞外RNA(exRNA)和細胞外泌體(EV)報道的涌現,凸顯了外泌體及其內含物作為疾病和治療靶標的生物標志物的潛力,其中最突出應用集中在在腫瘤學領域。目前越來越多的科研經費注入到EV的研究中來。 長久以來,雖然已有一些研究標明目前不同儲存條件對外泌體存在影響,但外泌體保存條件的標準仍未定義有統一定論。上海交通大學研究了不同pH、溫度和凍融次數等儲存條件對外泌體的數量變化和細胞攝...
莫能菌素鈉(Monein.sodium salt)是一種抗生素,行駛Na+離子載體的功能。莫能菌素鈉的功能包括能阻止糖蛋白的分泌,通過細胞周期停滯和凋亡抑制幾種淋巴瘤細胞系的增殖,以及阻止神經酰胺通過高爾基體轉運等。圖1莫能菌素鈉結構式 細胞內的多泡體(MVBs)是一種由細胞內吞形成的結構,其中包含著許多通過將內體膜發芽到隔室腔中而形成的小囊泡。MVBs與質膜的融合后向細胞外分泌外泌體...
·試劑盒規格、功能Q1-1:本試劑盒中含有外泌體檢測用的抗體嗎?A1-1:本試劑盒中不含外泌體檢測用的熒光標記抗體。熒光素結合抗CD63抗體(產品編號:018-27641)和紅色熒光色素結合抗CD63抗體(產品編號:011-27751),或者其他合適的熒光標記抗體需另行購買。Q1-2:可以使用熒光標記二抗進行檢測嗎?A1-2:可以,分離外泌體后,按照以下操作進行一抗反應、二抗反應和游離細胞計數法分...
·試劑盒規格、功能Q1-1:一定要制備標準品嗎?制備標準品時,是否必須使用MagCapture?外泌體提取試劑盒PS?A1-1:定量檢測時,需要制備作為標準品的細胞外泌體。超速離心法和聚合物沉淀法等提取的細胞外泌體也可作為標準品,但還是推薦使用與檢測原理相同的PS親和法提取的細胞外泡作為標準品。(詳細制備方法請參考MagCapture?外泌體提取試劑盒PS的使用說明書)。Q1-2:為什么沒有配套的...
Anti Asialo GM1的抗血清可以與NK細胞(自然殺傷細胞)結合,抑制NK細胞非特異性殺傷靶細胞的活性。靶細胞包括腫瘤細胞,同種異體移植的器官、組織等。可用于藥物篩選、器官移植、自身免疫疾病研究等。NK細胞屬于天然免疫細胞,具有免疫監視功能。 特異性:小鼠、大鼠的NK細胞,小鼠單核細胞(不含有NK細胞的肝臟細胞,骨髓,胎兒肝臟細胞,裸鼠巨噬細胞的脾細胞),胎兒T淋巴細胞(12天)...
Phos-tag? SDS-PAGE是使用了Phos-tag? Acrylamide或SuperSep的SDS-PAGE。可通過條帶的遷移率差異,指示磷酸化蛋白的磷酸化水平。·特點·SDS-PAGE的條帶根據蛋白的磷酸化水平變化·Phos-tag?的支持文獻眾多·Phos-tag? SDS-PAGE的原理1.SDS-PAGE膠中的Phos-tag? 捕獲磷酸化蛋白。2.電泳中的磷酸化蛋白的...
·評價ULTRARIPA Kit B buffer單獨提取脂籬蛋白的能力(數據提供:東京大學大學院藥學系研究科衛生化學教室) 用PBS清洗COS-1細胞后,用SDS buffer、1%Triton X-100 buffer,ULTRARIPA Kit A buffer以及ULTRARIPA Kit B buffer溶解,離心(14,000rpm,5min,4°C)。分離可溶性組分和不溶性組分...
·實驗材料及方法材料的獲取:1年齡小鼠的上、下肢骨以及脊椎骨(切除軟組織)一次固定:4%多聚甲醛溶液·10%福爾馬林溶液二次固定:純乙醇部分脊椎骨的非脫鈣GMA樹脂包埋處理,其他部分做脫鈣處理。↓脫脂、脫鈣:脫鈣液是ZnSO4加EDTA溶液。(與其它方法相比)脫鈣裝置Histra-DC(普通光)8~16℃連續操作。↓脫水、包埋:ETP(Sakura產品)處理16小時,使用點為58-60℃嵌入式硬石...
“在細胞培養的路上,有多虐心就有多少需要值得注意的地方。小小的瓶皿之中,細胞點點,引無數英雄競掛東南枝。正所謂“萬事開頭難”,即便是細胞復蘇與保存這兩件看似簡單的事情,也能造成實驗汪內心無比巨大的陰影面積。”在2016年10月一篇名為:實驗新人必讀:細胞培養那些事兒。詳細闡述了細胞凍存相關問題。引起了細胞生物學的重視。 在細胞凍存中存在三大問題。一、凍存液的配方...